Fosforlanish modifikatsiyasi
Fosforlangan oqsillar va peptidlar bo'yicha tadqiqotlar odamlarga yuqoridagi jarayonning mexanizmini tushuntirishga va hayot faoliyatining mohiyatini tushunishga yordam beradi. So'nggi yillarda proteomika texnologiyasining uzluksiz rivojlanishi bilan oqsil fosforlanishini o'rganishga tobora ko'proq e'tibor qaratilmoqda. Ko'pgina tabiiy toksinlar va patogenlar hujayra ichidagi oqsillarning fosforlanish holatini o'zgartirish orqali ham o'z ta'sirini ko'rsatadi.
Fosforlangan polipeptidlar asosan Ser, Tyr va Thr ga tegishlidir. Qoldiqning yon zanjir gidroksil guruhi kislota fosfat polipeptidiga o'zgartiriladi. Hozirgacha polipeptidlarning fosforillanish modifikatsiyasi asosan post-fosforlanish usuli va ikkita sintez usulini o'z ichiga oladi:
Monomer usuli bilan o'zgartirilganda, fosforlangan aminokislota kattaroq yon zanjirning modifikatsiyasi guruhidan kelib chiqqan sterik to'siq tufayli peptid zanjiri bilan kondensatsiyalanishi qiyin bo'ladi va keyinchalik aminokislotalarni kiritish qiyinroq bo'ladi. Ayniqsa, u fosforlanish joyining bir nechta modifikatsiyasini o'z ichiga olgan bo'lsa, sintez juda qiyinlashadi va yakuniy mahsulot murakkab tarkibiy qismlarga ega, ajratish qiyin va juda past hosildorlikka ega. Shuning uchun, peptid zanjiridagi bir nechta uchastkalar fosforlanganda, post-fosforlanish usulini ko'rib chiqish mumkin. Asosiy sintez jarayoni polipeptid sintezi tugagandan so'ng etiketlanadigan aminokislotalarning yon zanjiri himoya guruhlarini tanlab olib tashlashdir. Tyr uchun himoyalanmagan yon zanjirli Thr aminokislotalar bevosita reaksiya uchun ishlatilishi mumkin. 1% TFA/DCM da yon zanjirni himoya qiluvchi guruh. Muayyan sharoitlarda uni miqdoriy jihatdan olib tashlash mumkin. Post{8}}fosforlanish jarayonida bisbenzilfosforamiditdan foydalanish mumkin. Tetrazol gidroksil guruhiga bog'langan fosforamidit tetrazol faol oraliq mahsulotini hosil qiladi, so'ngra reaktsiyani yakunlash uchun fosforil guruhini hosil qilish uchun peroksitsid sharoitida oksidlanadi.
- Biz pSer, pTyr, pThr va D-pSer, D-pTyr, D-pThr Fosforlanishni o‘zgartirish xizmatlarini taqdim etamiz.
- Bir vaqtning o'zida 2 ta sayt, 3 ta sayt, 4 ta sayt va 5 ta uchastkaning fosforillanish modifikatsiyalari amalga oshirilishi mumkin.
Fosforlangan peptidlarSintetik holat (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) kutish)
1. Ketma-ketlikda 4 ta fosforlanish joylari mavjud (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), Sofligi 95% va tugallanish sikli 3 hafta.
